经过多年的研究和实践,总结出单光束型分光光度计实现自动波长扫描检测的基本原理,称之为扫描三步法:

   第一步: 薄立一条补偿光能量随波长变化的负高压变化曲线,简称建立负高压曲线。扫描检测过程中, 波段两端边缘的光能录与最高光能量之变化达10的负三次方以上，若固定一个高压值,就会出现某些波段的谱线能量超出检测极限,而某些波段则检测不出的现象, 这样获得的谱图是绝对不正确的。单光束型分光光度计采用改变放大器的增益从理论上是可行的,但其难度相对于改变光电倍增管的负高压来改变输出增益大得多。计算机根据预定的信号输出值, 对每一波长信号输出进行判断,计算机通过DAC调整PMT的负高压值,使信号输出值达到预定的值。计算机把每一波长对应的负高压值贮存起来,获得了一条负高压曲线。

   第二步：建立参比光束检测信息曲线。置参比物(空气或蒸馏水)于光路中,使仪器完全按第一步波长扫描的参数(波长范围、扫描速度、狭缝宽度) 再重复扫描,利用计算机贮存的负高压曲线,检测每一波长的光电信号值，最后建立起一束参比光束检测信息曲线。

   第三步: 建立样品的光谱吸收曲线。有了参比信息后,置样品于光路中,仪器又重复前二步波长扫描参数, 再次进行波长扫描,检测每一波长下样品对光的吸收量,这种情况下,每一波长的负高压值与检测参比信息时完全相同。

   扫描三步法是建立在仪器稳定的基础上。因此光源稳定电源,光电倍增管的负高压电源都可以达到较长时间的稳粤性, 保证在使用过程不会因外界环境、电源电压(在规定范围内) 的变化而引起检测的改变。在7230型单光束型分光光度计的信号检恻和处理系统中均采用了新的器件和技术,如前置放大器采用新一代的无零漂运算大放器,克服了以往直流放大零点漂移的缺点；在信号处理时采用数字滤波,使稳定性进一步提高。实践证明,采取了若干有效的措施之后,在第一步至第三步的过程中,扫描的精度完全可以保证的。