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实验用水纯度与等级

[导读]纯水制备技术可归纳为蒸馏、离子交换、 微孔过滤、活性炭吸附、超滤及反渗透。单一技 术具有其技术优势和某种局限,产水的技术指标存在 差别,完成实验室不同等级纯水制备往往需要两种技术或多种技术的组合或逐级运用。

水纯度通常采用电导法测得,即在25 ℃的水溶 液中放置2个相距1 cm的电极板,两端加1 V左右的电 位,测定通过1 cm3水的电流信号[4-5]。电导率与电流 强度成正比以μs/cm或ms/m表示,电导率的倒数 为阻抗以MΩ•cm@25 ℃表示,纯水的理论值分别为 0.05482 μs/cm和18.248 MΩ•cm。 实验室纯水标准主要可参照国家实验室分析用水 标准GB/T6682-2008、国际标准化组织ISO3696、美 国实验与材料学会ASTM D1193以及美国临床与实验 室标准研究所CLSI等,综合主要技术指标见表1[6-7]。 医疗临床、科研和制药等相关领域用水对细菌 数、内毒素含量等指标另有要求;如CLSI要求I级纯 水的细菌数控制在10 cfu/ml,中国药典注射用水的 标准[7]是<10/100 ml,ASTM将控制细菌和内毒素 水平分为A、B、C的3个等级,分别为10/1000 ml、 10/100 ml、100/10 ml和0.03、0.25 EU/ml[8]。有机 全碳是反映水中有机物污染程度的重要指标,ASTM 对各级纯水均有规定,中国药典注射用水和纯水的标 准是≤0.50 mg/L。

1.2 纯水制备技术 本研究表1显示,如果采用自来水为源水达到不 同等级纯度往往需要组合两种或两种以上技术逐级完 成

1.2.1 I级纯水 I级纯水即称之为超纯水,是在II级或III级纯水 基础上制备。市售超纯水机大多集成了预滤、离子交 换、活性碳吸附以及微超滤等技术[1,8-10]。 (1)预滤。建立在仪器本系统泵驱动下的正压过滤 基础上,以去除源水中存在的100 μm左右粒径的颗 粒物,对下一级纯水柱起保护作用。建议在主要以蒸 馏水为源水的超纯水机上配置,也作为其他单一或组 合纯水技术的前级处理。 (2)离子交换。通过内置的阴离子树脂和阳离子树 脂,分别静电吸引供水中的阳离子和阴离子而置换出 H+和OH-,形成H2O,单独使用离子交换可生成II级 纯水。技术局限为:①产量有限,一旦全部结合为被 置换占据后,离子仍游离存在,需要更换;②不能有 效去除有机物、热源及细菌等;③化学再生的去离子 床可产生有机物和颗粒。在离子交换基础上可结合电 去离子(Electro deion ization,EDI)技术,在电场作 用下吸附于树脂上的离子分别选择性的通过阳离子或 阴离子渗透膜迁移到高浓度侧而排出,同步实现了离 子交换、迁移渗透和交换树脂的电再生,故又称作连 续电去离子法,水纯度可达到15 MΩ•cm[11-13]。 (3)活性碳吸附。由有机材料制成带有迷宫小孔的 多孔颗粒,展开面积很大,1 g活性碳可达1000 m2,溶 解于水中的有机分子进入孔中在万有引力的作用下结合在孔壁上。有天然活性碳和人工活性碳之分,能有效吸 附可溶性有机物和氯,但不能除去离子和微粒子。 (4)微(超)滤。运用切向流超滤技术,发挥着分子 筛作用,能有效滤除颗粒物、生物大分子、热源、酶 类、微生物和胶体物,除用于化学合成等高级别实验 外,由于可有效去除热源和DNA酶、RNA酶,还可 作为非常理想的细胞培养和分子生物学实验用水,其 缺陷则为不能够去除可溶性无机物和有机物,当高分 子物累积过多,存在着污染、阻塞问题。选择性集成 上述技术生产的超纯水机可产出10.0~18.0 MΩ•cm 两类I级纯水,广泛用于要求消除溶液痕量本底影响 的化学和生物学实验,如LC、LC-MS、ICP-MS、 qPCR、电泳、细胞培养、组织学及化学元素分析 等。若用于实验室特殊目的,可组合以下配置:①微 孔滤器,一般为0.2 μm的圆盘滤器,作为最后纯化 步骤安装在出水端,又称之为终端滤器。能有效滤去 细菌以及大于其孔径的颗粒物,如树脂碎片、碳末及 胶体颗粒等。用于静注、血清、抗体及培养基等制备 用水,但不能去除无机物、有机物、热源及病毒,使 用寿命有限;②UV辐照,在出水路径用254 nmUV 灯辐照,微生物细胞中的DNA和蛋白吸收UV导致其 失活;新近有采用185 nm和254 nm两个波长UV光组 合,能产生有机物的光氧化,使有机物溶解转化为 CO2,产出TOC≤5 ppb的高纯度水。

1.2.2 II级纯水 经反渗透、蒸馏或结合离子交换制备,适用于 灵敏度要求较高的化学分析目的。反渗透(reverse osmosis,RO)是经济的纯化水方法,其核心是RO 膜,即半透膜。RO膜的孔结构较UF膜还紧密,能够 去除颗粒、细菌以及>200 Dalton分子量的有机物(包 括热源)达95%~99%。在半透膜两侧存在着浓度差, 在渗透压作用下低浓度侧的水分子向高浓度侧移动, 稀释过程终止于两侧压力达到平衡。制作RO水是在 高浓度施加一个与渗透相反的压力,迫使水通过半透 膜而被收集(未通过半透膜的水被排斥掉),称之为反 渗透。蒸馏是传统的水纯化技术,可以去除广谱污 染物,理想的阻抗值在0.5~1 MΩ•cm之间,水中总 离子污染物约500 ppb;采用石英材质的蒸馏器进行 双蒸、3次蒸馏效果较佳。但蒸馏过程也会携带某些 污染物随之被冷凝,从玻璃或金属接口能提取出硅、 钠、锡及铜等污染物。沸点<100 ℃的有机物将自动 转为蒸馏液,沸点>100 ℃的有机物能溶解在水蒸汽中也进入到蒸馏液。在蒸馏过程中也可能为水道中水 的氯与天然有机物发生反应提供动能,生成新的有机 化合物。因此,蒸馏水中的TOC水平是在100 ppb左 右。蒸馏制备需要较长的储存时间,易受空气中的无 机有机挥发物、细菌、颗粒物、藻类以及塑料容器中 的有机物、玻璃容器中的离子再次污染。

1.2.3 III级纯水 经蒸馏或离子交换技术制备,用于常规化学分析 实验及器皿的最终清洗。 不同级别或不同纯化技术配置产出的纯水有不同 的实验用途、成本也不同,必须根据实验目的结合各 项纯水技术指标进行合理选择,既要避免纯水的纯度 不能满足实验要求,又要防止不必要的浪费。


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